黎長征（廣西大化瑤族自治縣人民醫(yī)院 廣西大化 530800）
【關(guān)鍵詞】尿常規(guī) 尿液分析儀 顯微鏡檢查
尿液是血液通過腎小球?yàn)V過、腎小管和集合管的重吸收及排泄產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物[1]。尿液在調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)、酸堿平衡及排泄廢物中起到十分重要的作用，由于血液與全身各組織、器官的密切關(guān)系，因此尿液的組成和性狀可反映機(jī)體代謝情況及各系統(tǒng)功能狀態(tài)，尤其與泌尿系統(tǒng)疾病直接有關(guān)。尿液檢驗(yàn)又稱尿液分析，是泌尿系統(tǒng)進(jìn)行疾病診斷、療效及預(yù)后判斷的首選項(xiàng)目[2]。
尿液一般檢驗(yàn)主要包括傳統(tǒng)的物理學(xué)（肉眼）檢查、化學(xué)檢查和顯微鏡檢查�，F(xiàn)代尿液一般檢驗(yàn)以尿干化學(xué)試帶和尿液化學(xué)分析儀方法替代傳統(tǒng)的化學(xué)檢查，具有快速正確的優(yōu)點(diǎn)，但不能代替?zhèn)鹘y(tǒng)的尿沉渣顯微鏡檢查[3]。現(xiàn)代尿液檢驗(yàn)方法，尚有放射免疫法、尿酶聯(lián)免疫法、色譜法、分子生物學(xué)法、電鏡法、流式細(xì)胞儀法等多種檢驗(yàn)方法，可檢測尿中各種蛋白、氨基酸、酶、激素、抗體、細(xì)胞因子等，對診斷疾病及估計(jì)治療效果起了十分重要的作用[4]。
1 尿沉渣顯微鏡檢查
此項(xiàng)檢查是尿常規(guī)檢查中的重要項(xiàng)目之一。尿沉渣檢查是用顯微鏡對尿沉淀物進(jìn)行檢查，識(shí)別尿液中細(xì)胞、管型、結(jié)晶、細(xì)菌、寄生蟲等各種病理成份；輔助對泌尿系統(tǒng)疾病作出診斷、定位、鑒別診斷及預(yù)后判斷的重要常規(guī)試驗(yàn)項(xiàng)目[5]。在一般性狀檢查或化學(xué)試驗(yàn)中不能發(fā)現(xiàn)的變化，�？赏ㄟ^沉渣檢查來發(fā)現(xiàn)。尿沉渣檢查可分為非染色尿沉渣鏡檢、染色尿沉渣鏡檢和尿沉渣定量檢查。非染色尿沉渣鏡檢，應(yīng)取混勻新鮮尿液，直接涂片或取10ml尿離心（水平式離心機(jī)、離心半徑15cm，1500r/min，378G）離心5min后棄去上清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使沉渣有形成并充分混勻，取尿沉渣20ul，滴入載玻片上，用18 18mm的蓋玻片覆蓋。尿沉渣鏡檢觀察，用10 10鏡頭，觀察其中有形成份的全貌和管型。用10 40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成份和計(jì)算數(shù)量，應(yīng)觀察10個(gè)視野所見最低和最高值，再計(jì)算出平均每一個(gè)視野的數(shù)值，記錄結(jié)果。管型用高倍鏡鑒定，但計(jì)數(shù)數(shù)量按低倍鏡觀察20個(gè)視野，算出平均一個(gè)視野平均值，記錄結(jié)果。參考值：①細(xì)胞成份；每高倍鏡視野所見的最低～最高值；紅細(xì)胞0～3/HP；白細(xì)胞0～5/HP。②管型（透明）：每低倍鏡視野平均值0～1/全片。③尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍視野（+）、（2+）、（3+）、（4+）報(bào)告[2]。染色尿液沉渣鏡檢可分為離心法及混勻一滴尿法。離心法敏感，檢測陽性率高，為目前住院病人，尤其是內(nèi)科和泌尿科病人常規(guī)檢測方法，但其手續(xù)繁瑣、費(fèi)時(shí)，且因操作條件不同，如離心的尿量、轉(zhuǎn)速和時(shí)間、保留尿沉渣體積等不同而使結(jié)果不一致[6]�；靹蛞坏文蚍ê唵我仔校栃月实�，易漏診，常用于非泌尿系統(tǒng)疾病的過篩檢查，除明顯混濁的血尿、膿尿外應(yīng)強(qiáng)調(diào)用離心法，用染色時(shí)透明管型不易漏檢，也有助于其它細(xì)胞成份結(jié)構(gòu)觀察。尿沉渣定量檢查，其方法為過篩法和一小時(shí)尿沉渣計(jì)數(shù)。過篩法主要留取病人新鮮晨尿，混合后直接滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)，計(jì)數(shù)5大格中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞及管型數(shù)，結(jié)果 2得出每ul內(nèi)的數(shù)。參考值：正常人每ul新鮮尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞為0～2/ul，超過了2～5/ul為可疑，＞10/ul為陽性。1小時(shí)尿沉渣計(jì)數(shù)，其方法為：患者先排尿棄去，準(zhǔn)確收集3小時(shí)尿液于清潔干燥容器內(nèi)送檢，準(zhǔn)確測量3小時(shí)尿量，充分混合。取混勻尿液10ml，置刻度離心管中，1500r/min離心5min，用吸管吸棄上層尿液9ml，留下1ml，充分混勻。吸收混勻尿液1滴，注于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi)。細(xì)胞共數(shù)十大方格，管型計(jì)數(shù)20個(gè)大方格。參考值：紅細(xì)胞0～100000/1小時(shí)尿；白細(xì)胞0～200000/1小時(shí)尿，管型＜3400/1小時(shí)尿[7]。
對尿沉渣有形成份的識(shí)別除了應(yīng)用普通光學(xué)顯微鏡之外，還可用偏差顯微鏡、位相顯微鏡、熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。尿沉渣顯微鏡檢查以它獨(dú)特的臨床價(jià)值仍是尿液分析中不可缺少的檢查手段[8]。但由于尿沉渣操作費(fèi)時(shí)，在大批量標(biāo)本檢查時(shí)，特別是門診病人急需試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，每個(gè)標(biāo)本都經(jīng)嚴(yán)格操作得出沉渣報(bào)告是困難的，因此需要找一個(gè)簡單、快速的方法進(jìn)行篩選，將完全正常的標(biāo)本篩出后，有利于對異常的標(biāo)本進(jìn)行規(guī)范性檢查，干化學(xué)尿液分析提供了篩選的試驗(yàn)手段[9]。
2 尿液自動(dòng)化學(xué)分析儀
現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，使尿液化學(xué)分析實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化，在尿液化學(xué)分析儀上運(yùn)用多聯(lián)尿干化學(xué)試帶可同時(shí)檢測尿液中10多種化學(xué)成分。干化學(xué)分析是利用液體標(biāo)本直接加到干燥試劑上，以標(biāo)本中水為溶劑引起特定化學(xué)反應(yīng)的方法�？赏瑫r(shí)測定尿PH、尿蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、隱血、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽、白細(xì)胞、比密等[10]。近年來11聯(lián)尿試帶也已問世，增加了除上述10項(xiàng)外的抗壞血酸項(xiàng)目，來反映尿中維生素C的含量。尿液自動(dòng)化學(xué)分析儀工作的基本原理是反射光度法。即用尿干化學(xué)分析試帶與尿中相應(yīng)化學(xué)成份反應(yīng)，當(dāng)該產(chǎn)生顏色變化的試帶，被波長不同的發(fā)光二極管照射后，產(chǎn)生反射光。反射光由光電管接受，光信號(hào)轉(zhuǎn)化成為電訊號(hào)，電訊號(hào)傳送至模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，轉(zhuǎn)換成數(shù)值，經(jīng)微處理控制器處理，自動(dòng)顯示結(jié)果。通常試帶顏色深淺與被測中物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)成正比，而與反射光的強(qiáng)度成反比[11]。其操作方法為：吸取混勻尿液約10ml，在尿分析儀上作尿化學(xué)10項(xiàng)測定，測試完畢后，標(biāo)本再以1500r/min離心沉淀5min，棄去上清液，取沉渣約0.2ml涂片鏡檢。尿干化學(xué)分析儀參考范圍：PH5～7，比重（SG）1.015～1.025；蛋白質(zhì)（pro）陰性；葡萄糖（GLU）陰性；酮體（KET）陰性；膽紅素（BIL）陰性；亞硝酸鹽（NIT）陰性；白細(xì)胞（LEU）陰性；紅細(xì)胞陰性：維生素C 20～100mg/L。尿液自動(dòng)化學(xué)分析儀操作簡便、快速、準(zhǔn)確、結(jié)果可靠，在許多國家已經(jīng)把它作為常規(guī)方法在臨床檢驗(yàn)中廣為應(yīng)用[12]。開機(jī)平衡后幾分鐘即可報(bào)告結(jié)果，故極適合用于急診標(biāo)本。另外，由于干化學(xué)分析除了儀器和干片外，無需貯備任何其它試劑和配制任何溶液，故對于相對獨(dú)立的門診部或診所及病人的床頭檢查和家庭監(jiān)護(hù)，這類儀器極為適用。但也有其缺點(diǎn)，如果使用不當(dāng)或許多中間環(huán)節(jié)及影響因素都將直接影響自動(dòng)化分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅會(huì)引起實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤差，甚至延誤診斷，因此要求操作者對自動(dòng)化儀器的原理、性能、注意事項(xiàng)及影響因素等方面的知識(shí)有充分了解，正確使用自動(dòng)化儀器，這樣才能使尿液分析儀得出的結(jié)果更可靠、準(zhǔn)確[13]。自動(dòng)分析也不能完全取代涂片鏡檢，尤其是管型、紅細(xì)胞、膿細(xì)胞、結(jié)晶等可能漏檢或不正確，所以說不能完全依賴尿液分析儀，必須結(jié)合鏡檢，才能糾正分析儀不能檢出的結(jié)果，為臨床提供正確報(bào)告，故鏡檢在尿檢查中是十分重要的[14]。
3 全自動(dòng)尿液分析儀
目前尿沉渣檢查多采用人工顯微鏡檢查作為主要檢測手段，然而其遇到的首要問題是方法如何統(tǒng)一，鏡檢如何標(biāo)準(zhǔn)化。在整個(gè)手工鏡檢過程中，取多少尿離心，離心力大小，離心時(shí)間長短，最后剩下多少沉渣物，取多少鏡檢；所加蓋玻片的面積，顯微鏡放大倍率、觀察多少視野及報(bào)告方式等，國內(nèi)外很不一致。同時(shí)由于尿標(biāo)本成分復(fù)雜、成分鑒別的主觀性、尿沉渣的報(bào)告方式不統(tǒng)一、尿沉渣參考值不一致等原因，使得檢測結(jié)果由于報(bào)告速度慢、檢驗(yàn)人員勞動(dòng)強(qiáng)度大，檢測結(jié)果個(gè)體誤差大、重復(fù)性較差而無法滿足臨床的要求[15]。SYSMEX公司研制生產(chǎn)的全自動(dòng)尿有形成份分析儀UF-100在這樣的背景下應(yīng)運(yùn)而生，由于它具有手工操作無法比擬的重要精度，可以完全自動(dòng)地對尿液中各有形成份作模擬鑒別和計(jì)數(shù)，并能獲得多項(xiàng)更客觀而有效的分析結(jié)果，其定量報(bào)告可有助于臨床的療效監(jiān)控。其對紅細(xì)胞形態(tài)的鑒別可有助于臨床了解泌尿系統(tǒng)出血部位以及儀器的高檢測效率等多方面的先進(jìn)性與優(yōu)越性，而成為尿沉渣檢查篩選手段的首選工具[16]。UF-100全自動(dòng)尿有形成份分析儀采用先進(jìn)的激光流式細(xì)胞檢測技術(shù)及熒光染色技術(shù)，并與電阻抗測定法結(jié)合對尿有形成份進(jìn)行直接鑒別及計(jì)數(shù)，使自動(dòng)化尿檢獲得了重大突破。UF-100裝備有綜合性數(shù)據(jù)提示信號(hào)系統(tǒng)，可協(xié)助操作員迅速確定需要復(fù)查的標(biāo)本。由用戶定義的數(shù)據(jù)提示信號(hào)還可以設(shè)定需要的分析靈敏度，幫助檢測可疑標(biāo)本，為臨床提供有用信息。觸摸感應(yīng)式的彩色液晶屏幕不僅可以顯示數(shù)據(jù)，同時(shí)還可以輸入字母及數(shù)據(jù)，分析操作只需將標(biāo)本架設(shè)置在所定的位置上，按下按鈕，便可啟動(dòng)自動(dòng)分析功能，使實(shí)驗(yàn)室具有卓越的效率。UF-100還具有綜合質(zhì)量控制程序，備有12個(gè)文件及每個(gè)定量參數(shù)的180個(gè)數(shù)據(jù)，提供可信賴的監(jiān)控系統(tǒng)，以保證最佳性能�？纱鎯�(chǔ)1000個(gè)標(biāo)本的散射圖和直方圖，還包含標(biāo)本的物理化學(xué)特性的綜合數(shù)據(jù)。雙向連接口能夠?qū)崿F(xiàn)測試指令與主機(jī)及化學(xué)定性檢查裝置之間的全自動(dòng)通訊，從而建立了一個(gè)可靠的多功能工作站[17]。UF-100測定原理為：吸入800ul尿液后自動(dòng)加以稀釋和混合，并對細(xì)胞、細(xì)菌等有形成份作特異性染色，通過加壓使細(xì)胞進(jìn)入充滿鞘液的流室。因鞘液的約束下細(xì)胞排成單列，經(jīng)流室噴嘴噴出，形成的細(xì)胞柱與激光束垂直相交，使激活的細(xì)胞產(chǎn)生熒光。流式細(xì)胞入口兩端電極間的恒定直流電使有形成份通過時(shí)產(chǎn)生與細(xì)胞大小呈正比的電阻變化。通過測定前向散射光、熒光的波幅和強(qiáng)度及電阻抗的變化報(bào)告12個(gè)參數(shù)，對細(xì)菌、白細(xì)胞等5種有形成分進(jìn)行分析[18]。UF-100操作簡便，檢測速度快，無需離心標(biāo)本，僅需70s便可生成打印的檢驗(yàn)報(bào)告，每小時(shí)能完成100份標(biāo)本的檢測，可使臨床醫(yī)生在第一時(shí)間段獲得尿液檢查的有關(guān)信息，但也有假陽性、假陰性結(jié)果，還不能完全取代傳統(tǒng)顯微鏡鏡檢，雖可用于臨床尿路感染的篩檢，但不可替代定量細(xì)菌培養(yǎng)。
綜上所述，尿流式沉渣分析、尿干化學(xué)與傳統(tǒng)手工操作是三種完全不同原理的分析方法，雖然都能分析尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)、細(xì)菌等，但由于原理不同，結(jié)果肯定不一致。只有認(rèn)識(shí)了它們的原理，才能正確理解認(rèn)識(shí)這種差異[19]。無論上述哪一種方法，都不能說是很完善的篩檢方法。但相比較而言，UF-100假陰性率最低，且檢測速度快，相對于尿沉渣鏡檢或試紙法來說，UF-100篩檢效果較好，能滿足對陽性標(biāo)本作進(jìn)一步的病原體分離培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗(yàn)的需求。若結(jié)合干化學(xué)試帶和鏡檢，可以為臨床提供更多、更準(zhǔn)確的信息。
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